¿Cómo generar un modelo tridimensional in vitro a partir de un adenocarcinoma mamario murino?

Autores/as

  • María Belén PALMA
  • Marina MARTINEZ
  • Carlos LUZZANI
  • Ana María INDA
  • Ana Lía ERRECALDE
  • Santiago Gabriel MIRIUKA
  • Marcela Nilda GARCIA

Palabras clave:

mamosferas, adenocarcinoma mamario murino, células madre mesenquimales

Resumen

Las mamosferas son un modelo esferoide tumoral multicelular. Estas son utilizadas como un sistema de cultivo que se asemeja a la tridimensionalidad de los tumores. En este trabajo, hemos desarrollado este modelo utilizando un adenocarcinoma mamario murino con el fin de poder estudiar la fisiología tumoral y posibles aplicaciones terapéuticas. Se han probado diversas técnicas descriptas en trabajos previos. La mejor condición fue usar placas multiwells-96 en forma de V con la adición de una monocapa de agarosa, ya que se generaron esferas compactas y robustas. Además, hemos realizado tinciones histológicas de las mamosferas con hematoxilina-eosina para la observación de su estructura mediante microscopia óptica, y técnicas de inmunohistoquímica para evaluar el índice de proliferación celular y de neovascularización, con bromodeoxiuridina y VEGF (factor de crecimiento de endotelio vascular), respectivamente. Además, hemos estudiado la formación de estas mamosferas utilizando células tumorales y células madre mesenquimales derivadas de cordones umbilicales humanos para evaluar su interacción.

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Citas

Carvalho M, Costa E, Miguel S, Correia I – (2016). Tumor spheroid assembly on hyaluronic acid-based structures: A review. Carbohyd polym, 150, 139-148.

Clarke KE, Tams DM, Henderson AP, Roger MF, Whiting A, Przyborski SA- (2016). A robust and reproducible human pluripotent stem cell derived model of neurite outgrowth in a three-dimensional culture system and its application to study neurite inhibition. Neurochem Int, 106:74-84.

Costa EC, Gaspar VM, Coutinho P, Correia IJ- (2014). Optimization of Liquid Overlay Technique to Formulate Heterogenic 3D Co-Cultures Models. Biotechnol. Bioeng. 11:1672-1685.

Cuiffo BG and Karnoub A- (2012). Mesenchymal stem cells in tumor development. Emerging roles and concepts. Cell Adh Migr, 6:220-230.

Fleisig H, Wong J- (2012). Measuring Cell Cycle Progression Kinetics with Metabolic Labeling and Flow Cytometry. J. Vis. Exp22:1-6.

Furnus CC, Inda AM, Andrini LB, García MN, García AL, Badrán A, Errecalde AL- (2003). Chronobiology of the proliferative events related to angiogenesis in mice liver regeneration after partial hepatectomy. Cell Biol Int 27: 383–386.García MN, Andrini LB, Inda AM, Ronderos JR, Hijano JC, Errecalde A- (2010). Changes in VEGF expression and DNA synthesis in hepatocytes from hepatectomized and tumour-bearing mice. Cell Biol. Int. 34:283–286.

García MN, Andrini L, Martinez M, Inda A, Palma MB, Miriuka S, Errecalde AL- (2015). Circadian rhythms of proliferation events in two mouse carcinomas. Biol- Rhythm Res. 46:573-578.

Hasselbach LA, Irtenkauf SM, Lemke NW, Nelson KK, Berezovsky AD, Carlton ET, Transou AD, Mikkelsen T, deCarvalho A- (2014). Optimization of High Grade Glioma Cell Culture from Surgical Specimens for Use in Clinically Relevant Animal Models and 3D Immunochemistry. J. Vis. Exp. 83:1-9.

Inda AM, García MN, Andrini LB, García AL, Fernández Blanco A, Furnus CC, Galletti SM, Brandoni J, Martinez JG, Prat GD, Errecalde AL- (2009). Evaluation of Angiogenesis with the Expression of VEGF-C and CD34 in Human Colon Cancer. Current Chemical Biology 3: 302-305.

Lee G, Hall R, Ahmed A- (2016). Cancer stem cells: celular plasticity, niche and its clinical relevance. J Stem Cell Res Ther. 6:1-20

Nagelkerke A, Bussink J, Sweep F, Span PN- (2013). Generation of multicellular tumor spheroids of breast cancer cells: How to go threedimensional. Anal Biochem 437: 17-19.

Razian G, Yu Y, Ungrin M- (2013). Production of large numbers of size-controlled tumor spheroids using microwell plates. J Vis Exp 81:1-6.

Solomon MA, Lemera J, D´Souza GG- (2016). Development of an in vitro tumor spheroid culture model amenable to high-throughput testing of potential anticancer nanotherapeutics. J Liposome Res. 26: 246-260.

Sun Z, Wang S, Chunhua Zhao R- (2014). The roles of mesenchymal stem cells in tumor inflamatory microenvironment. J Hematol Oncol. 7:2-10.

Suzuki K, Sun R, Origuchi M, Kanehira M, Takahata T, Itoh J, Umezawa A, Kijima H, Fukuda S, Saijo Y- (2011). Mesenchymal stromal cells promote tumor growth. Through the enhancement of neovascularization. Molmed. 17: 579-587.

Wharton´s jelly-derived multipotent mesenchymal stromal cells obtained from bovine umbilical cord and maintained in a defined serum-free three-dimensional system. BMC Biotechnology 12:1-11.

Wong C, Vosburgh E, Levine AJ, Cong L, Xu EY- (2012). Human neuroendocrine tumor cell lines as a three-dimensional model for the study of human neuroendocrine tumor therapy. J Vis Exp 66:1-7.

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Publicado

2019-01-16

Cómo citar

PALMA, M. B., MARTINEZ, M., LUZZANI, C., INDA, A. M., ERRECALDE, A. L., MIRIUKA, S. G., & GARCIA, M. N. (2019). ¿Cómo generar un modelo tridimensional in vitro a partir de un adenocarcinoma mamario murino?. Revista Ciencias Morfológicas, 20(1), 16–21. Recuperado a partir de https://revistas.unlp.edu.ar/Morfol/article/view/5633

Número

Sección

Trabajos Originales